Soutenance de thèse de Marjorie DELAHAYE

La leucémie aigüe lymphoblastique de type B (LAL-B) affecte les cellules B au cours de leur développement dans la moelle osseuse. Le microenvironnement est important dans le soutien de la différenciation normal et pathologique. Les cellules stromales sécrètent la galectine1 (Gal1) capable d’interagir avec le pré-BCR, exprimé par les cellules pré-B, induisant leur prolifération. Dans le laboratoire nous utilisons des souris porteuses du gène chimérique Pax5-Elastine (P5E) que l'on retrouve dans la LAL-B humaine. Ces souris développent spontanément des LAL-B pré-BCR+. La Gal1 peut influencer la prolifération normale des cellules pré-B, les souris P5E ont donc été croisées avec des souris Gal1KO (G1KO). L'analyse de souris âgées de 5 semaines - dépourvues de mutations secondaires - a montré que la prolifération des cellules pré-leucémiques (PL) était altérée en l'absence de Gal1. De plus, alors que les cellules PL s'accumulent à la transition pro-B/pre-B chez les jeunes souris P5E, un blocage à la transition plus tardive pré-B/immature B a pu être observé chez une partie des souris P5EG1KO. De même que la signalisation des cellules PL est modifiée en absence de Gal1 qui est majoritairement IL-7R dépendant contrairement à une souris P5E avec une signalisation majoritairement Pré-BCR dépendante. Les souris P5E développent une LAL-B pré-BCR+ alors que les souris P5EG1KO développent une LAL pré-BCR+ ou une LAL BCR+, soit une LAL-B à un stade plus avancé de la différenciation. Lorsqu’on regarde les sites de mutations secondaires, on s’aperçoit que les LAL-B provenant de souris P5E ont des mutations sur les gènes Ptpn11 et Jak3. Alors que les LAL-B de souris P5EG1KO ont des mutations essentiellement sur Jak3. En conclusion, nos résultats suggèrent que les cellules stromales Gal1+ dictent le destin leucémique des cellules pré-B, au moins partiellement, par le biais d'une prolifération dépendante du pré-BCR. Mots-clés : Galectine-1, LAL-B, cellules stromales, interactions

B-type acute lymphoblastic leukemia (B-ALL) affects B cells during their development in the bone marrow. The microenvironment is important in supporting normal and pathological differentiation. Stromal cells secrete galectin1 (Gal1) able of interacting with pre-BCR, expressed by pre-B cells, inducing their proliferation. In the laboratory, we use mice carrying the chimeric Pax5-Elastin (P5E) gene found in human B-ALL. These mice spontaneously develop pre-BCR+ B-ALL. Gal1 can influence the normal proliferation of pre-B cells, so P5E mice were crossed with Gal1KO mice (G1KO). Analysis of 5-week-old mice - devoid of secondary mutations - showed that pre-leukemic (PL) cell proliferation was impaired in the absence of Gal1. Moreover, while PL cells accumulate at the pro-B/pre-B transition in young P5E mice, a blockage at the later pre-B/immature B transition could be observed in part of the P5EG1KO mice. Similarly, PL cell signaling is altered in the absence of Gal1, which is more IL-7R-dependent than in P5E mice with predominantly pre-BCR-dependent signaling. P5E mice develop pre-BCR+ ALL-B, whereas P5EG1KO mice develop pre-BCR+ ALL, but also BCR+ ALL, i.e. ALL-B at a more advanced stage of differentiation. When we look at the secondary mutation sites, we see that B-ALL from P5E mice have mutations in the Ptpn11 and Jak3 genes. Whereas LAL-B from P5EG1KO mice have mutations mainly in Jak3. In conclusion, our results suggest that Gal1+ stromal cells dictate the leukemic fate of pre-B cells, at least partially, through pre-BCR-dependent proliferation. Keywords: Galectin-1, B-ALL, stromal cells, interactions